Bacteriophages against Vibrio coralliilyticus and Vibrio tubiashii: Isolation, Characterization and Remediation of Larval Oyster Mortalities

Vibrio coralliilyticus and Vibrio tubiashii are pathogens responsible for high larval oyster mortalities in shellfish hatcheries. Bacteriophage therapy was evaluated to determine its potential to remediate these mortalities. Sixteen phages against V. coralliilyticus and V. tubiashii were isolated and characterized from Hawaiian seawater. Fourteen isolates were members of the Myoviridae family and two were Siphoviridae. In proof-of-principle trials, a cocktail of five phages reduced mortalities of larval Eastern oysters (Crassostrea virginica) and Pacific oysters (Crassostrea gigas) by up to 91% at 6 days post-challenge with lethal doses of V. coralliilyticus. Larvae survival depended on the oyster species, the quantity of phages and vibrios applied, and the species and strain of Vibrio. A later-generation cocktail, designated VCP300, was formulated with three lytic phages subsequently named Vibrio phage vB_VcorM-GR7B; vB_VcorM-GR11A, and vB_VcorM-GR28A (abbreviated 7B, 11A and 28A). Together, these three phages displayed host specificity toward eight V. coralliilyticus strains and a V. tubiashii strain. Larval C. gigas mortalities from V. coralliilyticus strains RE98 and OCN008 were significantly reduced by > 90% (P < 0.0001) over 6 days with phage treatment compared to untreated controls. Genomic sequencing of phages 7B, 11A and 28A revealed 207,758; 194,800; and 154,046 bp, linear DNA genomes, respectively, with the latter showing 92% similarity to V. coralliilyticus phage YC, a strain from the Great Barrier Reef, Australia. Phage 7B and 11A genomes showed little similarity to phages in the NCBI database. This study demonstrates the promising potential for phage therapy to reduce larval oyster mortalities in oyster hatcheries. IMPORTANCE Shellfish hatcheries encounter episodic outbreaks of larval oyster mortalities, jeopardizing the economic stability of the hatcheries and commercial shellfish industry. Shellfish pathogens, like Vibrio coralliilyticus and Vibrio tubiashii, have been recognized as major contributors of larval oyster mortalities in U.S. East and West Coast hatcheries for many years. This study isolated, identified, and characterized bacteriophages against these Vibrio species, and demonstrated their ability to reduce mortalities from V. coralliilyticus in larval Pacific oysters and both V. coralliilyticus and V. tubiashii in larval Eastern oysters. Phage therapy offers a promising approach in stimulating hatchery production to ensure the well-being of hatcheries and the commercial oyster trade.

Draft Genome Sequence of the Emerging Bivalve Pathogen Vibrio tubiashii subsp. europaeus

Vibrio tubiashii subsp. europaeus is a bivalve pathogen isolated during episodes of mortality affecting larval cultures in different shellfish hatcheries. Here, we announce the draft genome sequence of the type strain PP-638 and describe potential virulence factors, which may provide insight into the mechanism of pathogenicity.

Nồng độ ức chế tối thiểu (Minimal Inhibitory Concentration - MIC) của một số loại kháng sinh đến vi khuẩn phân lập được từ cá dìa thương phẩm mắc bệnh lở loét (Siganus guttatus, Bloch, 1787)

Nghiên cứu được tiến hành nhằm xác định nồng độ ức chế tối thiểu (Minimal Inhibitory Concentration - MIC) của một số loại kháng sinh đến vi khuẩn phân lập được từ cá dìa thương phẩm mắc bệnh lở loét (Siganus guttatus). Từ kết quả phân lập định danh cho thấy 2 chủng Vibrio parahaemolyticus VPMP22 và Vibrio tubiashii ATCC 19109 có mặt trên các vết lở loét ở cá dìa thương phẩm. Kết quả thử nghiệm MIC cho thấy các loại kháng sinh Cefuroxim, Cefotaxim, Tetracycline, Erythromicin, Rifamicin có nồng độ ức chế vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus VPMP22 tốt nhất dưới 0.21 µg/ml. Các kháng sinh có Cefuroxim, Cefotaxim, Oxytetraciline, Erythromicin, Trimethoprim nồng độ ức chế vi khuẩn Vibrio tubiashii ATCC 19109 tốt nhất dưới 1.25 µg/ml. Penicillin có nồng độ ức chế tối thiểu cao nhất đối với cả 2 chủng vi khuẩn trên (80 µg/ml), cho thấy 2 chủng vi khuẩn trên đã có sự kháng thuốc đối với loại kháng sinh này. Do đó, trong phòng trị bệnh lở loét trên cá dìa nên sử dụng Cefuroxim và Cefotaxim để có hiệu quả cao nhất trong phòng trị bệnh.