An organic solvent-based protocol for depletion of abundant proteins in plasma of Leprosy patients

In present study protein was purified from human plasma with the method involving organic solvents. Organic solvents like chloroform, methanol and isopropanol remove the lipoproteins and glycoproteins whereas TCA and Acetone are known to deplete the abundant proteins like albumins and globulins from the plasma of the blood. Purified protein was subjected to the estimation by Bradford Assay (96 well plate method). In this process a dye called Brilliant Blue forms complex with the purified protein of plasma because of which the maximum absorption of dye shifts to 595nm. So, the absorbance was observed at wavelength of 595nm. Purified protein along with unpurfled plasma was imposed on SDS-PAGE. SDS (sodium dodecyl sulphate) is an anionic detergent which first denatures the protein and then provides all the protein fragments a negative charge. After which polyacrylamide gel the separates the protein fragments on the basis of their molecular mass. Results of SDS-PAGE concluded that the protein was purified when its bands were compared to that of unpurfled plasma, which means the treatment with organic solvents is useful in purifying protein from plasma of leprosy patient.

Profil Distribusi dan Klirens Pengkontras CT SCAN AuNP-PAMAM G4- NIMOTUZUMAB disimulasikan menggunakan Senyawa 198AuNP-PAMAM G4-NIMOTUZUMAB

Riset nanopartikel emas sebagai senyawa pengkontras CT-Scan telahdimulai sejak 3 tahun lalu di Indonesia. Riset interaksi antibodi monoklonal,khususnya nimotuzumab, dengan reseptor EGFR/HER1 dimulai sejak lima tahun lalu dan telah dimanfaatkan untuk penyiapan senyawa pengkontras MRI (Magnetic Resonance Imaging) spesifik target melalui pelabelan konjugat dendrimer-nimotuzumab dengan radionuklida. Sintesis senyawa AuNP-PAMAM G4-Nimotuzumab untuk diagnosis dan terapi pada kanker paru-paru telah berhasil dilakukan di PTRR dan hasil karakterisasinya dengan menggunakan beberapa metode seperti KCKT (Kromatografi Cair Kinerja Tinggi), SDS (Sodium Dodecyl Sulphate) page elektroforesa dan TEM (Transmission Electron Microscopy) menunjukkan bahwa senyawa yang terbentuk adalah sebagai AuNP-PAMAM G4-Nimotuzumab. Pada penelitian ini telah dilakukan uji pre klinis dari senyawa pengkontras AuNPPAMAM G4-nimotuzumab meliputi uji distribusi dan klirens dengan disimulasikan menggunakan senyawa radioaktiv 198AuNP-PAMAM G4- nimotuzumab. Hasil uji distribusi senyawa 198AuNP-PAMAM G4- nimotuzumab menunjukkan penimbunan pada beberapa organ seperti ginjal, hati dan limpa, sedangkan dari hasil uji klirens diperoleh waktu paruh biologis senyawa tersebut adalah 11.77 hari. Hasil pemeriksaan terhadap urin dengan menggunakan kolom PD-10 (Sephadex G25) menunjukkan bahwa ~ 85 % yang dikeluarkan lewat urin masih berbentuk AuNP-PAMAM G4- Nimotuzumab. Hasil pencitraan dengan alat autoradiography menunjukkan bahwa sampai dengan 48 jam setelah penyuntikan, akumulasi radioaktivitas yang terdeteksi masih terdapat pada hati.