The formation of phosphatidylethanolamine from diglyceride by extracts of Escherichia coli

1980 ◽  
Vol 58 (8) ◽  
pp. 655-659 ◽  
Author(s):  
P. Proulx ◽  
C. Tomalty ◽  
F. Landry ◽  
J. J. Milczarek
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Phosphatidic Acid ◽  
Particulate Fraction ◽  
E Coli

Extensively dialyzed cell-free homogenates or washed particulate fractions, of Escherichia coli in the presence of added CTP, Mg2+, serine, and rac-glycerol 3-phosphate, incorporated [32P]phosphatidic acid into phosphatidylglycerol and cardiolipin but not into phosphatidylethanolamine. [14C]Phosphatidic acid could be incorporated by these preparations into phosphatidylethanolamine in the absence of added CTP and Mg2+. CDP-diglyceride did not significantly affect the formation of [14C]phosphatidylethanolamine from [14C]phosphatidic acid. 14C-labeled diglyceride was also readily incorporated into phosphatidylethanolamine in the absence of added cofactors by both homogenate and particulate fraction. Serine stimulated the incorporation somewhat whereas CTP + Mg2+ diminished this conversion slightly because of concurrent [14C]phosphatidic acid and [14C]phosphatidylglycerol formation. CDP-diglyceride did not significantly affect the conversion of 14C-labeled diglyceride to phosphatidylethanolamine. Dialyzed 14C-labeled cytosol fractions of E. coli, obtained from cells grown in medium containing [14C]serine, transferred some of their label to phosphatidylethanolamine in the presence of fresh particulate fraction. This transfer was stimulated by added diglyceride. The results indicate that phosphatidylethanolamine can be synthesized from exogenous diglyceride by a pathway which does not require CDP-diglyceride as an intermediate but which likely makes use of an endogenous cofactor supplying phosphorylethanolamine and (or) phosphorylserine.

Use of [1-14C]oleate labelled autoclaved Escherichia coli as a membranous substrate for measurement of in vitro phospholipase D activity

1992 ◽  
Vol 70 (1) ◽  
pp. 43-48 ◽  
Author(s):  
S. S. Ghosh ◽  
Richard C. Franson
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Phosphatidic Acid ◽  
Phospholipase D ◽  
Phospholipase A ◽  
Dependent Manner ◽  
Concentration Dependent Manner ◽  
E Coli ◽  
Streptomyces Chromofuscus ◽  
Hydrolysis Of

Autoclaved Escherichia coli labelled with [1-14C]oleate in the 2-acyl position have been used extensively to measure phospholipase A2 activity in vitro. The present study demonstrates that this membranous substrate is also useful for the measurement of in vitro phospholipase D activity. Phospholipase D from Streptomyces chromofuscus catalyzed the hydrolysis of [1-14C]oleate labelled, autoclaved E. coli optimally at pH 7.0–8.0 to generate [14C]phosphatidic acid in the presence of 5 mM added Ca2+. Other divalent cations would not substitute for Ca2+. Activity was linear with time and protein up to 30% of the hydrolysis of substrate. Phospholipase D activity was stimulated in a dose-dependent manner by the addition of Triton X-100. The activity was increased 5.5-fold with 0.05% Triton, a concentration that totally inhibited hydrolysis of E. coli by human synovial fluid phospholipase A2. Accumulation of [14C]diglyceride was observed after 10 min of incubation. This accumulation was inhibited by NaF (IC50 = 18 μM) or propanolol (IC50 = 180 μM) suggesting the S. chromofuscus phospholipase D was contaminated with phosphatidate phosphohydrolase. Phosphatidic acid released by the action of cabbage phospholipase D was converted to phosphatidylethanol in an ethanol concentration dependent manner. These results demonstrate that [1-14C]oleate labelled, autoclaved E. coli can be used to measure phospholipase D activity by monitoring accumulation of either [14C]phosphatidic acid or [14C]phosphatidylethanol.Key words: Escherichia coli, substrate, phospholipase D, Streptomyces chromofuscus, sodium fluoride, propranolol.

Reduction of nonheme iron in the respiratory chain of Escherichia coli

1970 ◽  
Vol 48 (7) ◽  
pp. 777-783 ◽  
Author(s):  
P. D. Bragg
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Cytochrome B ◽  
Respiratory Chain ◽  
Nonheme Iron ◽  
Particulate Fraction ◽  
Phenazine Methosulfate ◽  
Iron Species ◽  
E Coli

A particulate fraction of E. coli contained flavoprotein, nonheme iron, ubiquinone, and cytochromes b1 and o. About 20% of the nonheme iron was reducible by NADH, ascorbate – phenazine methosulfate, and dithionite to a form which reacted rapidly with o-phenanthroline. Reduction of this o-phenanthroline-reacting nonheme iron species by NADH was inhibited by 2-heptyl-4-hydroxyquinoline N-oxide which inhibited the respiratory chain between ubiquinone and cytochrome b1. Reduction of cytochrome b1 could occur without reduction of this nonheme iron species. These results are discussed relative to the position of nonheme iron in the respiratory chain of E. coli.

Sites of Adsorption of the Bacteriophages T3 and T5 on the Wall of Escherichia Coli B.

1967 ◽  
Vol 25 ◽  
pp. 96-97
Author(s):  
Manfred E. Bayer
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Cell Wall ◽  
Electron Microscope ◽  
Uranyl Acetate ◽  
E Coli ◽  
Receptor Sites ◽  
Rigid Cell Wall ◽  
Host Cell Surface ◽  
Bacterial Viruses ◽  
Escherichia Coli B

Bacterial viruses adsorb specifically to receptors on the host cell surface. Although the chemical composition of some of the cell wall receptors for bacteriophages of the T-series has been described and the number of receptor sites has been estimated to be 150 to 300 per E. coli cell, the localization of the sites on the bacterial wall has been unknown.When logarithmically growing cells of E. coli are transferred into a medium containing 20% sucrose, the cells plasmolize: the protoplast shrinks and becomes separated from the somewhat rigid cell wall. When these cells are fixed in 8% Formaldehyde, post-fixed in OsO4/uranyl acetate, embedded in Vestopal W, then cut in an ultramicrotome and observed with the electron microscope, the separation of protoplast and wall becomes clearly visible, (Fig. 1, 2). At a number of locations however, the protoplasmic membrane adheres to the wall even under the considerable pull of the shrinking protoplast. Thus numerous connecting bridges are maintained between protoplast and cell wall. Estimations of the total number of such wall/membrane associations yield a number of about 300 per cell.

The Influence of Glycosylation on the Catalytic and Fibrinolytic Properties of Pro-Urokinase

1992 ◽  
Vol 68 (05) ◽  
pp. 539-544 ◽  
Author(s):  
Catherine Lenich ◽  
Ralph Pannell ◽  
Jack Henkin ◽  
Victor Gurewich
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Mammalian Cell ◽  
Human Gene ◽  
Culture Media ◽  
Mammalian Cell Culture ◽  
Glycosylation Site ◽  
Clot Lysis ◽  
Cell Culture Media ◽  
E Coli ◽  
The Uk

SummaryWe previously found that human pro-UK expressed in Escherichia coli is more active in fibrinolysis than recombinant human pro-UK obtained from mammalian cell culture media. To determine whether this difference is related to the lack of glycosylation of the E. coli product, we compared the activity of E. coli-derived pro-UK [(-)pro-UK] with that of a glycosylated pro-UK [(+)pro-UK] and of a mutant of pro-UK missing the glycosylation site at Asn-302 [(-) (302) pro-UK]. The latter two pro-UKs were obtained by expression of the human gene in a mammalian cell. The nonglycosylated pro-UKs were activated by plasmin more efficiently (≈2-fold) and were more active in clot lysis (1.5-fold) than the (+)pro-UK. Similarly, the nonglycosylated two-chain derivatives (UKs) were more active against plasminogen and were more rapidly inactivated by plasma inhibitors than the (+)UK.These findings indicate that glycosylation at Asn-302 influences the activity of pro-UK/UK and could be the major factor responsible for the enhanced activity of E. coli-derived pro-UK.

Usefulness of a Multiplex PCR for Detection of Diarrheagenic Escherichia coli in a Diagnostic Microbiology Laboratory Setting

2016 ◽  
Vol 1 (2) ◽  
pp. 38-42 ◽  
Author(s):  
Khairun Nessa ◽  
Dilruba Ahmed ◽  
Johirul Islam ◽  
FM Lutful Kabir ◽  
M Anowar Hossain
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Multiplex Pcr ◽  
Clinical Laboratory ◽  
Proteinase K ◽  
Microbiology Laboratory ◽  
Pcr Assay ◽  
E Coli ◽  
Diarrheagenic Escherichia Coli ◽  
Multiplex Pcr Assay ◽  
Diagnostic Microbiology

A multiplex PCR assay was evaluated for diagnosis of diarrheagenic Escherichia coli in stool samples of patients with diarrhoea submitted to a diagnostic microbiology laboratory. Two procedures of DNA template preparationproteinase K buffer method and the boiling method were evaluated to examine isolates of E. coli from 150 selected diarrhoeal cases. By proteinase K buffer method, 119 strains (79.3%) of E. coli were characterized to various categories by their genes that included 55.5% enteroaggregative E. coli (EAEC), 18.5% enterotoxigenic E. coli (ETEC), 1.7% enteropathogenic E. coli (EPEC), and 0.8% Shiga toxin-producing E. coli (STEC). Although boiling method was less time consuming (<24 hrs) and less costly (<8.0 US $/ per test) but was less efficient in typing E. coli compared to proteinase K method (41.3% vs. 79.3% ; p<0.001). The sensitivity and specificity of boiling method compared to proteinase K method was 48.7% and 87.1% while the positive and negative predictive value was 93.5% and 30.7%, respectively. The majority of pathogenic E. coli were detected in children (78.0%) under five years age with 53.3% under one year, and 68.7% of the children were male. Children under 5 years age were frequently infected with EAEC (71.6%) compared to ETEC (24.3%), EPEC (2.7%) and STEC (1.4%). The multiplex PCR assay could be effectively used as a rapid diagnostic tool for characterization of diarrheagenic E. coli using a single reaction tube in the clinical laboratory setting.Bangladesh J Med Microbiol 2007; 01 (02): 38-42

Antagonistic activity of Bacillus subtilis strains isolated from various sources

2018 ◽  
Vol 8 (2) ◽  
pp. 354-364
Author(s):  
A. N. Irkitova ◽  
A. V. Grebenshchikova ◽  
A. V. Matsyura
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Bacillus Subtilis ◽  
Wild Strain ◽  
Fish Farming ◽  
Antagonistic Activity ◽  
Antagonistic Effect ◽  
E Coli ◽  
Long Period ◽  
Test Culture ◽  
Agar Media

<p>An important link in solving the problem of healthy food is the intensification of the livestock, poultry and fish farming, which is possible only in the adoption and rigorous implementation of the concept of rational feeding of animals. In the implementation of this concept required is the application of probiotic preparations. Currently, there is an increased interest in spore probiotics. In many ways, this can be explained by the fact that they use no vegetative forms of the bacilli and their spores. This property provides spore probiotics a number of advantages: they are not whimsical, easily could be selected, cultivated, and dried. Moreover, they are resistant to various factors and could remain viable during a long period. One of the most famous spore microorganisms, which are widely used in agriculture, is <em>Bacillus subtilis</em>. Among the requirements imposed to probiotic microorganisms is mandatory – antagonistic activity to pathogenic and conditional-pathogenic microflora. The article presents the results of the analysis of antagonistic activity of collection strains of <em>B. subtilis</em>, and strains isolated from commercial preparations. We studied the antagonistic activity on agar and liquid nutrient medias to trigger different antagonism mechanisms of <em>B. subtilis</em>. On agar media, we applied three diffusion methods: perpendicular bands, agar blocks, agar wells. We also applied the method of co-incubating the test culture (<em>Escherichia coli</em>) and the antagonist (or its supernatant) in the nutrient broth. Our results demonstrated that all our explored strains of <em>B. subtilis</em> have antimicrobial activity against a wild strain of <em>E. coli</em>, but to varying degrees. We identified strains of <em>B. subtilis</em> with the highest antagonistic effect that can be recommended for inclusion in microbial preparations for agriculture.</p><p><em><br /></em><em></em></p>

NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG BẤT HOẠT ESCHERICHIA COLI TRONG NƯỚC BẰNG TIA CỰC TÍM VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA THIẾT BỊ TẠO MÀNG CHẤT LỎNG

2020 ◽  
Vol 129 (4B) ◽  
Author(s):  
Đặng Thị Thanh Lộc ◽  
Lê Văn Tuấn
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
E Coli

Công nghệ khử trùng nước không tạo ra các sản phẩm phụ độc hại ngày càng thu hút nhiều quan tâm nghiên cứu trong những năm gần đây. Nghiên cứu này trình bày kết quả khử trùng Escherichia coli trong nước bằng tia UV kết hợp với thiết bị tạo màng chất lỏng (LFFA). Sự nhạy cảm của vi khuẩn với sự khử trùng bằng UV hoặc UV/LFFA được xác định tại các điều kiện khác nhau của liều UV, tốc độ sục khí và mật độ ban đầu của vi khuẩn. Kết quả nghiên cứu cho thấy khử trùng bằng tia UV kết hợp với LFFA mang lại hiệu quả khử trùng cao hơn so với UV thông thường. Cụ thể, sự kết hợp của UV (liều UV = 20,83 mJ/cm2 và nhiệt độ phòng) và LFFA (tốc độ sục khí = 1,5 L/phút) đã bất hoạt hoàn toàn 5,4 log E. coli trong vòng 60 phút. Trong khi tại cùng một liều UV tương tự, khử trùng bằng tia UV chỉ giảm được 4,3 log vi khuẩn sau 75 phút. Nghiên cứu này hứa hẹn một khả năng áp dụng phương pháp hiệu quả để tăng cường hoạt tính diệt khuẩn của tia UV, nhằm giải quyết các mối quan tâm gần đây trong khử trùng nước.

Антимікробна резистентність провідних збудників інфекцій сечових шляхів у Києві (Україна)

2017 ◽  
Vol 1 (2) ◽  
pp. 48-60
Author(s):  
A.G. Salmanov ◽  
A.V. Rudenko
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
Pseudomonas Aeruginosa ◽  
Klebsiella Pneumoniae ◽  
Staphylococcus Epidermidis ◽  
Klebsiella Oxytoca ◽  
Enterobacter Aerogenes ◽  
Enterobacter Cloacae ◽  
Proteus Vulgaris ◽  
Providencia Rettgeri ◽  
E Coli

Мета роботи — вивчити резистентність до антибіотиків бактеріальних збудників інфекцій сечових шляхів (ІСШ), виділених у пацієнтів урологічного стаціонару в м. Києві. Матеріали і методи. Досліджено 1612 штамів бактерій, виділених із сечі хворих з ІСШ (цистит, уретрит, пієлонефрит), госпіталізованих в урологічне відділення ДУ «Інститут урології НАМН України» у м. Києві протягом 2016 р. Серед пацієнтів переважали жінки — 1201 (74,5 %). Вік хворих становив від 17 до 74 років. Для збору даних використано медичну документацію лікарні. Мікробіологічні дослідження виконано у лабораторії мікробіології ДУ «Інститут урології НАМН України». Аналізували результати культурального дослідження зразків сечі, зібраних за наявності клінічних ознак ІСШ. Дослідження клінічного матеріалу та інтерпретацію отриманих результатів проводили загальноприйнятими методами. Вивчено чутливість уропатогенів до 31 антибіотика дискодифузійним методом відповідно до рекомендацій Інституту клінічних та лабораторних стандартів США (Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)). Результати та обговорення. Аналіз мікробного спектра сечі виявив домінування серед уропатогенів штамів Escherichia coli (32,0 %), Enterococcus faecalis (19,5 %), Klebsiella pneumoniae (10,9 %), Staphylococcus epidermidis (8,9 %), S. haemolyticus (6,5 %) та Pseudomonas aeruginosa (6,4 %). Частка Enterococcus faecium, Enterobacter aerogenes і Streptococcus viridans становила відповідно 2,5, 2,2 і 1,6 %, Enterobacter cloacae, Klebsiella oxytoca, Acinetobacter baumannii, Proteus vulgaris та Providencia rettgeri — менше 1,0 %. У більшості випадків (69,7 %) мікроорганізми виділено у монокультурі, у решті випадків — у мікробних асоціа- ціях. Високу резистентність до тестованих антибіотиків виявили штами E. aerogenes (45,1 %), E. cloacae (45,7 %), E. faecium (40,9 %), E. faecalis (40,7 %), E. coli (39,9 %), P. aeruginosa (34,0 %), K. pneumoniae (28,6 %). Найбільш активними до уропатогенів були іміпенем (E. coli — 87,6 %, P. aeruginosa — 75,7 %, E. cloacae — 67,3 %, E. aerogenes — 72,6 %, K. pneumoniae — 93,2 %), меропенем (E. coli — 89,1 %, P. aeruginosa — 76,7 %, K. pneumoniae — 82,6 %), лефлоцин (E. coli — 74,5 %, ентерококи — 78,7 %, P. aeruginosa — 76,7 %, E. cloacae — 73,9 %, E. aerogenes — 80,4 %, K. pneumoniae — 83,5 %), амоксицилін/клавуланат (ентерококи — 84,6 %), фурагін (ентерококи — 82,6 %), цефоперазон (K. pneumoniae — 89,2 %, P. aeruginosa — 73,8 %), цефтріаксон (K. pneumoniae — 80,1 %). Висновки. Антибіотикорезистентність збудників ІСШ — важлива терапевтична проблема. Найбільшою активністю до уропатогенів характеризуються іміпенем, меропенем, лефлоцин, амоксицилін/ клавуланат, фурагін, цефоперазон, цефтріаксон, які можна розглядати як препарат вибору для призначення стартової терапії ІСШ. Необхідно здійснювати постійний моніторинг за резистентністю до дії антибіотиків. Політику використання антибіотиків у кожному стаціонарі слід визначати залежно від локальних даних щодо резистентності до протимікробних препаратів.

Антибіотикорезистентність нозокоміальних штамів Escherichia coli в хірургічних стаціонарах України: результати багатоцентрового дослідження (2011-2015 рр.)

2017 ◽  
Vol 1 (1) ◽  
pp. 29-48
Author(s):  
A.G. Salmanov
Keyword(s):  
Escherichia Coli ◽  
E Coli

Мета роботи — вивчити антибіотикорезистентність нозокоміальних штамів Escherichia coli, виділених у пацієнтів, госпіталізованих у хірургічні стаціонари різних регіонів України. Матеріали і методи. Досліджено 414 886 клінічних штамів E. coli, виділених у пацієнтів, госпіталізо- ваних у хірургічні відділення 47 багатопрофільних стаціонарів 24 областей України та м. Києва протягом 2011—2015 рр. Чутливість штамів E. coli вивчено до 36 антибіотиків (пеніцилін, ампіцилін, амоксицилін, оксацилін, ампіцилін/сульбактам, амоксицилін/клавуланат, цефазолін, цефалексин, цефуроксим, цефо- перазон, цефотаксим, цефтріаксон, цефтазидим, цефепім, іміпенем, меропенем, гентаміцин, амікацин, тобраміцин, нетилміцин, еритромицін, кларитроміцин, азитроміцин, лінкоміцин, кліндаміцин, тетрациклін, доксициклін, ванкоміцин, рифампіцин, офлоксацин, левофлоксацин, ломефлоксацин, норфлоксацин, гатифлоксацин, ципрофлоксацин, пефлоксацин) відповідно до рекомендованих Національним комітетом США (NCCLS) клінічних лабораторних стандартів. Результати та обговорення. У досліджуваних хірургічних стаціонарах 26,5 % штаммів E. coli були резистентними до всіх тестованих антибіотиків. Найактивнішими щодо штамів E. coli були іміпенем, тобраміцин, меропенем, левофлоксацин та амікацин. Висока резистентність спостерігалася до пені- циліну (56,9 %), лінкоміцину (41,4 %), кліндаміцину (41,1 %), ампіциліну (39,6 %), кларитроміцину (36,5 %), амоксициліну (36,1 %) та цефуроксиму (33,4 %). Висновки. Антибіотикорезистентність нозокоміальних штамів E. coli в досліджених стаціонарах, що є об’єктом дослідження, являє собою серйозну терапевтичну та епідеміологічну проблему. Найбіль- шою активністю до нозокоміальних штамів E. coli характеризуються іміпенем, тобраміцин, меропенем, левофлоксацин та амікацин. З огляду на постійні зміни та рівні резистентності нозокоміальних штамів E. coli, що спостерігається в регіонах України, необхідно здійснювати постійний моніторинг резистентності до дії антибіотиків у кожному стаціонарі і на основі отриманих локальних даних розробити лікарняний формуляр антибіотиків. Політика застосування антибіотиків у кожному хірургічному стаціонарі повинна визначатися залежно від локальних даних резистентності до протимікробних препаратів. Доцільно налагодити систему епідеміологічного нагляду за мікробною резистентністю на локальному, регіональному та національному рівнях.

Sign in / Sign up

Export Citation Format

Share Document