scholarly journals Phenotypic Characterization of Adherent Cells Population CD34+ CD90+ CD105+ Derived from Wharton’s Jelly

2017 ◽  
Vol 23 ◽  
pp. 1886-1895 ◽  
Author(s):  
Irena Walecka ◽  
Paulina Gil-Kulik ◽  
Arkadiusz Krzyżanowski ◽  
Marcin Czop ◽  
Dariusz Galkowski ◽  
...  
2012 ◽  
Vol 376 (1-2) ◽  
pp. 95-102 ◽  
Author(s):  
Chunyu Bai ◽  
Xiangcheng Li ◽  
Lingling Hou ◽  
Minghai Zhang ◽  
Weijun Guan ◽  
...  

2017 ◽  
Vol 13 (4) ◽  
pp. 491-498 ◽  
Author(s):  
Viviana Sanchez ◽  
Nerina Villalba ◽  
Luciano Fiore ◽  
Carlos Luzzani ◽  
Santiago Miriuka ◽  
...  

2017 ◽  
Vol 105 (4) ◽  
pp. 1034-1045 ◽  
Author(s):  
Cristian Martínez ◽  
Carlos Fernández ◽  
Miguel Prado ◽  
Andres Ozols ◽  
Daniel G. Olmedo

2010 ◽  
Vol 18 ◽  
pp. S237
Author(s):  
T. Margossian ◽  
J.-F. Stoltz ◽  
D. Bensoussan ◽  
C. Huselstein

2018 ◽  
Author(s):  
Αριστέα Μπάτσαλη

Συνεχώς αυξανόμενο είναι το ενδιαφέρον για τη χρήση των αρχέγονων μεσεγχυματικών κυττάρων (Mesenchymal Stem/Stromal Cells–MSCs) σε κλινικές εφαρμογές. Το ενδεχόμενο MSCs από ποικίλες πηγές να ικανοποιούν διαφορετικές κλινικές εφαρμογές μας ώθησε στην παρούσα μελέτη. Έτσι πραγματοποίησαμε μια συγκριτική μελέτη των βιολογικών ιδιοτήτων MSCs προερχόμενων από τη γέλη του Wharton (Wharton’s Jelly–WJ), την πιο πλούσια πηγή MSCs του ομφαλίου λώρου, και MSCs από τον μυελό των οστών (Bone Marrow–BM), του πιο εκτενώς μελετημένου πληθυσμού μεσεγχυματικών κυττάρων.Στη διάρκεια της μελέτης, MSCs απομονώθηκαν από τον μυελό αιματολογικά υγιών δοτών (n=18) και από τη γέλη του Wharton νεογνών πλήρους κυήσεως (n=18).Τα MSCs καλλιεργήθηκαν ex vivo για συνολικά δέκα ανακαλλιέργειες (Passage–P)υπό τις ίδιες συνθήκες. Σε παράλληλα πειράματα μελετήθηκαν τα ανοσοφαινοτυπικά χαρακτηριστικά των κυττάρων καθώς και χαρακτηριστικά που αφορούν την επιβίωση και την κυτταρική γήρανση όπως το δυναμικό πολλαπλασιασμού και η κατανομή τούς στον κυτταρικό κύκλο. Επιπλέον εκτιμήθηκε η έκφραση γονιδίων που σχετίζονται με τα σηματοδοτικά μονοπάτια του Wnt και του κυτταρικού κύκλου, ενώ πραγματοποιήθηκε και κυτταρογενετική ανάλυση των ex vivo καλλιεργούμενων MSCs ώστε να εκτιμηθεί η γενωμική τούς σταθερότητα.Επιπροσθέτως, μελετήθηκε η ικανότητα των MSCs, και από τις δύο πηγές, να υποστηρίζουν την ανάπτυξη αρχέγονων αιμοποιητικών κυττάρων, εκτιμώντας τη κλωνογονική ικανότητα των μη-προσκολλούμενων κυττάρων (Non Adherent Cells–NACs) σε συν‐καλλιέργειες φυσιολογικών CD34+ κυττάρων, με BM-MSCs ή WJMSCs.Επίσης μετρήθηκαν τα επίπεδα κυτταροκινών που σχετίζονται με την αιμοποίηση στα υπερκείμενα των MSC καλλιεργειών. Τέλος, εκτιμήθηκε η ικανότητα διαφοροποίησης των MSCs προς λιποκύτταρα και οστεοκύτταρα καθώς και η επίδραση των σχετιζόμενων με το Wnt-μονοπάτι μορίων WISP1 και sFRP4 στο δυναμικό διαφοροποίησης των WJ- MSCs.Από την ανάλυση των αποτελεσμάτων φάνηκε πως και οι δυο exvivo καλλιεργούμενοι MSC πληθυσμοί (BM-MSCs ή WJ-MSCs) εμφανίζουν παρόμοια μορφολογικά και ανοσοφαινοτυπικά χαρακτηριστικά. Επιπλέον δεν διέφεραν ως προς χαρακτηριστικά επιβίωσης και κυτταρικής γήρανσης, ενώ φάνηκε να φέρουν γενετικές αλλαγές σε πολύ χαμηλή συχνότητα στη διάρκεια των ανακαλλιεργειών. Τα WJ-MSCsεμφάνισαν υψηλότερο δυναμικό πολλαπλασιασμού, πιθανότατα λόγω ενεργοποίησης γονιδίων που διεγείρουν τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και ταυτόχρονης υποέκφρασης γονιδίων που αναστέλλουν τον κυτταρικό κύκλο. Ωστόσο, τα WJMSCsπαρουσίασαν μειωμένη ενδογενή δέσμευση προς κάποια σειρά (lineagepriming)καθώς και μειωμένη ικανότητα διαφοροποίησης προς οστεοκύτταρα και λιποκύτταρα, συγκριτικά με τα BM-MSCs. Το παραπάνω εύρημα συσχετίστηκε με τη διαφορετική έκφραση μορίων που σχετίζονται με το Wnt-σηματοδοτικό μονοπάτι,περιλαμβανομένων των WISP1 και sFRP4, και διερευνήθηκε αντιστοίχως η εμπλοκήτου καθενός μορίου στη διαφοροποίηση των WJ-MSCs. Μάλιστα χορήγηση των ανασυνδιασμένων ανθρώπινων πρωτεϊνών WISP1 και sFRP4 στα καλλιεργούμενα WJ-MSCs οδήγησε σε επαγωγή και βελτίωση της οστεογενετικής και λιπογενετικής ικανότητας των κυττάρων, αντιστοίχως. Τέλος, τα WJ-MSCs εμφάνισαν μειωμένη ικανότητα να υποστηρίζουν την αιμοποίηση σε σχέση με τα ομολογά τους μυελικά, πιθανότατα εξαιτίας της μειωμένης παραγωγής του παράγοντα του«στρώματος» SDF-1α (stromal cell-derived factor-1α).Συμπερασματικά τα μέχρι στιγμής δεδομένα συμβάλλουν στον καλύτερο χαρακτηρισμό των WJ-MSCs και των BM-MSCs αναδεικνύοντας τις ιδιαίτερες βιολογικές τους ιδιότητες, που θα πρέπει να λαμβάνονται υπόψιν κατά την επιλογή της καλύτερης πηγής MSCs για καθεμιά κλινική εφαρμογή.


Blood ◽  
2018 ◽  
Vol 132 (Supplement 1) ◽  
pp. 3953-3953
Author(s):  
Brea Lipe ◽  
Thomas Conley ◽  
Hani Awad ◽  
Jason H. Mendler ◽  
Jason R Myers ◽  
...  

Abstract Introduction: In previous work, we have demonstrated that culturing leukemia cell lines in decellularized Wharton's jelly (WJ) matrix (DWJM), the gelatinous material in umbilical cord tissues, resulted in chemotherapy resistance. To reduce the variability in the biochemical composition between different parts of the WJ matrix and to optimize our 3-dimensional (3D) DWJM-based extracellular matrix (ECM) model for in vitro culture of primary AML cells, we fabricated DWJM-derived porous disks with uniform architecture and pore-size by homogenization followed by lyophilization of human DWJM. Herein, we examine whether DWJM disks support primary leukemia cells and result in chemotherapy resistance. Methods: AML patient samples collected by leukapheresis were cultured in DWJM disks for one week. Non-adherent cells were first aspirated and adherent cells were separately isolated and assessed for viability, apoptosis, and colony forming unit (CFU). RNA sequencing was performed at the end of culture. Response to chemotherapy following treatment with doxorubicin was also assessed. For all studies, DWJM-adherent and non-adherent cells were compared to suspension culture controls. Metabolic pathway analyses were conducted using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). One-tailed t-test was used for comparison between the groups. Results: Consistent with our prior studies, adherent DWJM cells demonstrated less apoptosis (P=0.027) and greater CFU activity with larger and more dense colonies (1 vs 4/50,000 cells, P=0.0008). Co-culture of primary AML samples with DWJM reduced doxorubicin induced cell death (P=.047) preserving CFU activity (3.3 vs 0.3/300,000 cells, P=.047) compared to treatment of suspension culture cells. To understand the mechanisms by which co-culture with DWJM enhanced leukemic progenitor function and therapy resistance, we performed RNA-Seq analyses. RNA-Seq data analysis from day 7 demonstrated significant upregulation of FAM83A and MIR34A and downregulation of BPI, ZNF521, NHLH2, CD69, FKBP14, PBX1, TANC1, GRIN2b, MYO6, INHBA, SA1008, CXCL1, A1009, BLNK, MMP9, BHLHE41, and CD9 in the adherent population compared to the suspension population (adjusted P-value <0.05). Ingenuity Pathway Analysis (IPA) identified glutamate receptor signaling as the top impacted canonical pathway, suggesting differences in the predominant metabolic process between the two culture conditions. Additionally, IPA showed that FAM83A was the most upregulated molecule, while MT-TH and MT-TW were two of the most down-regulated molecules in the adherent cells. The DWJM culture condition was associated with a significant increase in lactate (P=0.020) and significant reduction in glucose (P=0.005) in culture supernatants compared to suspension controls. Conclusion: We demonstrate that DWJM disks support primary leukemia cell survival. DWJM-adherent cells demonstrate chemotherapy resistance in association with induction of glycolysis. Based on our RNA Seq data we hypothesize that leukemia cell adherence to DWJM upregulates FAM83A, which functions in the epidermal growth factor receptor (EGFR) signaling pathway. FAM83A is known to control PI3K-AKT-TOR signaling cascade. M-TOR, in turn is known to activate HIF-1α pathway, which regulates glycolysis (Figure-1). Additionally, down-regulation of mitochondria-related molecules (MT-TH and MT-TW) is consistent with a switch from oxidative phosphorylation to glycolysis in the adherent cells. Further work is ongoing to further understand the role of glycolysis in primary leukemia cell chemotherapy resistance. Disclosures Lipe: Celgene: Consultancy. Aljitawi:The University of Rochester Medical Center: Patents & Royalties: Pending patent related to decellularized Wharton's jelly matrix; Medpace: Consultancy.


2013 ◽  
Vol 376 (1-2) ◽  
pp. 199-199
Author(s):  
Chunyu Bai ◽  
Xiangchen Li ◽  
Lingling Hou ◽  
Minghai Zhang ◽  
Weijun Guan ◽  
...  

Sign in / Sign up

Export Citation Format

Share Document