scholarly journals Purification and characterization of NADPH–cytochrome c reductase from the midgut of the southern armyworm (Spodoptera eridania)

1979 ◽  
Vol 181 (3) ◽  
pp. 593-605 ◽  
Author(s):  
D L Crankshaw ◽  
K Hetnarski ◽  
C F Wilkinson
Keyword(s):  
Cytochrome C ◽  
Active Sites ◽  
Spodoptera Eridania ◽  
Cytochrome C Reductase ◽  
Nadph Cytochrome ◽  
Southern Armyworm ◽  
Ping Pong ◽  
Mammalian Liver ◽  
Nadph Cytochrome C Reductase

1. NADPH-cytochrome c reductase was solubilized with bromelain and purified about 400-fold from sucrose/pyrophosphate-washed microsomal fractions from southern armyworm (Spodoptera eridania) larval midguts. 2. The enzyme has a mol.wt. of 70 035 +/- 1300 and contained 2 mol of flavin/mol of enzyme consisting of almost equimolar amounts of FMN and FAD. 3. Aerobic titration of the enzyme with NADPH caused the formation of a stable half-reduced state at 0.5 mol of NADPH/mol of flavin. 4. Kinetic analysis showed that the reduction of cytochrome c proceeded by a Bi Bi Ping Pong mechanism. 5. Apparent Km values for NADPH and cytochrome c and Ki values for NADP+ and 2′-AMP were considerably higher for the insect reductase than for the mammalian liver enzyme. 6. These are discussed in relation to possible differences in the active sites of the enzymes.

scholarly journals Étude de l’effet du cadmium et du benzo[a]pyrène sur des enzymes de phase I et phase II de biotransformation chez le polychète Nereisdiversicolor

2009 ◽  
Vol 22 (3) ◽  
pp. 451-459
Author(s):  
Zied Bouraoui ◽  
Jihene Ghedira ◽  
Jamel Jebali ◽  
Mohamed Banni ◽  
Cristelle Clerendeau ◽  
...  
Keyword(s):  
Cytochrome C ◽  
Phase I ◽  
Phase Ii ◽  
Nereis Diversicolor ◽  
Cytochrome C Reductase ◽  
Nadph Cytochrome ◽  
Nadph Cytochrome C Reductase

Résumé Le présent travail reporte l’effet du cadmium (Cd), du benzo[a]pyrène (B[a]P) ainsi que leur mélange (Cd/B[a]P), à 1 µM, sur les activités d’enzymes impliqués dans la phase I et la phase II de biotransformation chez le polychète Nereis diversicolor en fonction du temps (après 12, 24, 36 et 48 h). L’effet d’une contamination aiguë par du cadmium à une dose de 1 µM après 12, 24 et 36 h montre une inhibition de l’activité NADPH cytochrome C réductase chez les individus contaminés comparés à leurs témoins relatifs, alors que le seul effet du cadmium sur l’activité glutathion-S-transférase n’est enregistré qu’après 36 h d’exposition. Quant au benzo[a]pyrène, les résultats montrent une augmentation significative de l’activité NADPH cytochrome C réductase après 12, 24 et 36 h d’exposition, alors que pour l’activité glutathion-S‑transférase, la variation significative entre les animaux témoins et traités n’est enregistrée qu’à 36 h d’exposition. Le mélange (Cd/B[a]P) inhibe l’activité NADPH cytochrome C réductase chez les individus traités par comparaison aux témoins relatifs et montre un effet inducteur sur l’activité GST sauf après 36 h d’exposition. Ces résultats montrent ainsi les interactions entre les polluants ainsi que leurs effets sur les organismes.

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