Effect of Transforming Growth Factor-β1 and -β2 onin vitroRabbit Corneal Epithelial Cell Proliferation Promoted by Epidermal Growth Factor, Keratinocyte Growth Factor, or Hepatocyte Growth Factor

1997 ◽  
Vol 65 (3) ◽  
pp. 391-396 ◽  
Author(s):  
YOICHI HONMA ◽  
KOHJI NISHIDA ◽  
CHIE SOTOZONO ◽  
SHIGERU KINOSHITA
Keyword(s):  
Cell Proliferation ◽  
Growth Factor ◽  
Transforming Growth Factor ◽  
Keratinocyte Growth Factor ◽  
Transforming Growth Factor Β1 ◽  
Corneal Epithelial Cell ◽  
Epithelial Cell Proliferation ◽  
Corneal Epithelial ◽  
Epidermal Growth ◽  
Hepatocyte Growth

Lidocaine Inhibits Tyrosine Kinase Activity of the Epidermal Growth Factor Receptor and Suppresses Proliferation of Corneal Epithelial Cells

2004 ◽  
Vol 100 (5) ◽  
pp. 1206-1210 ◽  
Author(s):  
Masashi Hirata ◽  
Masahiro Sakaguchi ◽  
Chikako Mochida ◽  
Chie Sotozono ◽  
Kyoko Kageyama ◽  
...  
Keyword(s):  
Cell Proliferation ◽  
Growth Factor ◽  
Epithelial Cell ◽  
Tyrosine Kinase ◽  
Kinase Activity ◽  
Epithelial Cell Proliferation ◽  
Tyrosine Kinase Activity ◽  
Corneal Epithelial Cells ◽  
Corneal Epithelial ◽  
Epidermal Growth

Background Although lidocaine is recognized as an excellent topical corneal analgesic, its toxic effect on corneal epithelial cells limits its use during corneal epithelial wound healing. Mechanism of the impairment of corneal reepithelialization with lidocaine, however, has not been evaluated. The authors' previous study revealed that lidocaine inhibits the activity of tyrosine kinase receptors through the interaction with specific amino acid sequences around autophosphorylation sites, including acidic, basic, and aromatic amino acids. Epidermal growth factor receptor (EGFR), a tyrosine kinase receptor with an important role in epithelial cell proliferation after corneal wounding, also possesses these amino acids sequences around autophosphorylation sites. The authors hypothesized that lidocaine would suppress tyrosine kinase activity of EGFR and would impair corneal epithelial cell proliferation. Methods To investigate the effect of lidocaine (4 microM-40 mM) on epidermal growth factor (EGF)-stimulated autophosphorylation of EGFR, the authors studied purified EGFR in microtubes. They cultured human corneal epithelial cells (HCECs) with EGF and lidocaine to investigate the effect of lidocaine on cell proliferation and on autophosphorylation of EGFR in HCECs. Results Lidocaine (> or =400 microM) significantly suppressed EGF-stimulated autophosphorylation of the purified EGFR. In the HCEC study, EGF alone stimulated cell proliferation and increased autophosphorylation of EGFR in HCECs. Lidocaine (> or = 400 microM) significantly suppressed both the proliferation of HCECs promoted by EGF and EGF-stimulated autophosphorylation of EGFR. Conclusion Lidocaine directly inhibits tyrosine kinase activity of EGFR and suppresses the corneal epithelial cell proliferation.

Wachstumsfaktorenkonzentration im Kulturüberstand von Keratozyten mit humanem Serum in vitro

2017 ◽  
Vol 235 (07) ◽  
pp. 840-845
Author(s):  
Nóra Szentmáry ◽  
Tanja Stachon ◽  
Ming-Feng Wu ◽  
Mona Bischoff ◽  
Manuela Huber ◽  
...  
Keyword(s):  
Growth Factor ◽  
Fibroblast Growth Factor ◽  
Transforming Growth Factor ◽  
Keratinocyte Growth Factor ◽  
Transforming Growth Factor Β1 ◽  
Fibroblast Growth ◽  
Fibroblast Growth Factor Basic ◽  
Hepatocyte Growth ◽  
Tgf Β1

Zusammenfassung Hintergrund Die Anwendung von Serumaugentropfen (AS) stellt eine alternative Behandlungsmethode für therapieresistente korneale Epitheldefekte dar. Bei persistierenden Epitheldefekten könnten Zytokine, die von Keratozyten im Stroma produziert werden, eine entscheidende Rolle bei der epithelialen Wundheilung spielen. Ziel dieser Studie ist es, Transforming Growth Factor β1 (TGF-β1), Keratinocyte Growth Factor (KGF), Hepatocyte Growth Factor (HGF) und Fibroblast Growth Factor basic (FGFb) im Kulturüberstand von Keratozyten mit humanem Serum (HS) in vitro zu untersuchen. Material und Methoden Serumaugentropfen von 10 Patienten wurden nach der Standardmethode der LIONS Hornhautbank Saar-Lor-Lux präpariert und bei − 80 °C tiefgefroren. Primäre humane Keratozyten wurden durch enzymatische Behandlung mit Kollagenase A (1 mg/ml) aus humanen Korneoskleralscheiben isoliert (n = 1) und in DMEM/Hamʼs Kulturmedium, versetzt mit 5% fetalem Kälberserum (FCS), kultiviert. Für den Testansatz wurden die Keratozyten mit 15 oder 30% HS (in DMEM/F14 ohne FCS) inkubiert und nach 24 h die Konzentration von TGF-β1, KGF, HGF und FGFb mittels Enzyme-linked Immunoabsorbent Assay (ELISA) aus dem Kulturüberstand bestimmt. Als Kontrolle wurden 15 oder 30% HS ohne Keratozyten nach 24 h Inkubationszeit (unter den gleichen Bedingungen wie die Keratozyten) verwendet. Ergebnisse Die HGF-Konzentration mit beiden HS-Konzentrationen war im Kulturüberstand von Keratozyten signifikant höher, im Vergleich zur HS-Kontrolle (ohne Keratozyten) nach 24 h Inkubationszeit (p < 0,01). Die FGFb-Konzentration war im Kulturüberstand mit 30% HS signifikant höher im Vergleich zur Kontrollgruppe ohne Keratozyten nach 24 Stunden Inkubationszeit (p < 0,01). Die TGF-β1- und KGF-Konzentrationen im Kulturüberstand blieben durch die Keratozyten unverändert. Schlussfolgerungen Durch die Anwesenheit von Keratozyten steigt die Konzentration von HGF und FGFb im Kulturmedium mit humanem Serum innerhalb von 24 Stunden an. Diese Konzentrationsänderungen könnten die Wundheilung bei Epitheldefekten beeinflussen.

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